超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過(guò)程中因?yàn)槿狈Ρ匾畔⒍鴽](méi)有獲得好體驗(yàn),更重要的是,寶貴的樣本會(huì)遭受本可避免的損失!登寧小編就教你正確使用超濾管。
選對(duì)截留分子量,事半功倍
如果目的蛋白是120kDa,請(qǐng)問(wèn)應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用1/2,1/3抑或1/6算法?一個(gè)確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個(gè)大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel再生纖維素膜得率超過(guò)90%。膜孔徑要小于目的分子。因?yàn)闃悠贩肿有螤畈煌?,為了zui大化樣品的回收,對(duì)于沒(méi)有參考的樣品,可以初步選擇截留分子量約為目的分子分子量1/2的膜。
倒轉(zhuǎn)離心,增大回收率
收取體積已經(jīng)很小的濃縮好的樣品時(shí),超濾管上樣體積有0.5/2/4/15/70mL等,除了采用低吸附的管材和zui低蛋白吸附的再生纖維素超濾膜,其中0.5mL,2mL和70mL的規(guī)格還特別設(shè)計(jì)了反轉(zhuǎn)回收模式,以便使已經(jīng)濃縮的樣品增大回收率。
更多關(guān)于超濾管的正確使用問(wèn)題:
蛋白在濃縮時(shí)出現(xiàn)了沉淀,如何改進(jìn)?
超濾管可以用酒精消毒滅菌么?
懷疑濃縮過(guò)程中目的蛋白和超濾膜之間可能存在非特異性吸附,如何改善?
有時(shí)候用超濾離心管連水都離不下來(lái),可能是什么原因?
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